Tot sobre la pols de Crizotinib

1. Què és la pols de Crizotinib?
2. Com funciona la pols de Crizotinib?
3. Pols de Crizotinib Materials i mètodes
4.Approvals i indicacions per a la pols de Crizotinib
5. Assaigs clínics per pols de Crizotinib
6.La conclusió de la pols de Crizotinib
7. On comprar pols de Crizotinib?


Crizotinib en pols de vídeo


Pols de I.Crizotinib Personatges bàsics:

Nom: Pols de Crizotinib
CAS: 877399-52-5
Fórmula molecular: C21H22Cl2FN5O
Pes molecular: 450.343
Punt de fusió: 197-203 ° C
Temps d'emmagatzematge: RT
Color: pols blanc a pols pàl·lid


1. Què és la pols de Crizotinib?aasraw

Pols de Crizotinib(nom comercial Xalkori, Pfizer) és un fàrmac anticancerígen que actua com un inhibidor de l'ALK (limfoma quinasa anaplàstica) i ROS1 (c-ros oncogene 1), aprovat per al tractament d'un carcinoma de pulmó no limitat (NSCLC) als Estats Units i alguns altres països, i sotmesos a assaigs clínics que avaluen la seva seguretat i eficàcia en el limfoma cel·lular anaplásico gran, el neuroblastoma i altres tumors sòlids avançats tant en adults com nens.

La pols de Crizotinib és un agent contra el càncer que actua com a inhibidor del limfoma quinálico anaplàstic i recentment ha estat aprovat per al tractament del carcinoma de pulmó cel·lular no petit. L'anàlisi retrosintètica d'aquesta molècula evidentment ens porta els ulls a dos blocs principals, tal com es descriu al Esquema 1 el 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol racèmic és un objectiu molt interessant per a les biotransformacions. De fet, alguns grups de recerca ja han informat els seus resultats sobre els mètodes biocatalítics o de biotransformació per arribar a l'intermediari desitjat.


2. Com ho fa Crizotinib en pols funciona?aasraw

La pols de Crizotinib té una estructura d'aminopiridina i funciona com un inhibidor de la proteïna quinasa per unió competitiva dins del butxaca d'enllaç ATP de quinasas objectiu. Sobre el 4% dels pacients amb carcinoma de pulmó de la cèl·lula no petita tenen una reordenació cromosòmica que genera un gen de fusió entre EML4 ('4 semblant a la proteïna associada a microtúbuls equinoderms') i ALK ('limfoma quinasa anaplàstica'), que produeix quinasa constitutiva activitat que contribueix a la carcinogènesi i sembla conduir el fenotip maligne. L'activitat quinasa de la proteïna de fusió està inhibida per pols de Crizotinib. Els pacients amb aquesta fusió de gens són generalment no fumadors joves que no tenen mutacions ni en el gen receptor del factor de creixement epidèrmic (EGFR) ni en el gen K-Ras. El nombre de nous casos d'ALK-fusion NSLC és de 9,000 a l'any als Estats Units i al voltant de 45,000 a tot el món.

Les mutacions de ALK es consideren importants per a la conducció del fenotip maligne en aproximadament 15% dels casos de neuroblastoma, una forma rara de càncer del sistema nerviós perifèric que es produeix gairebé exclusivament en nens molt petits.

La pols de Crizotinib inhibeix la tirosina quinasa del receptor del factor de creixement c-Met / Hepatocyte (HGFR), que participa en l'oncogènesi d'altres formes histològiques de neoplàsies malignes.

Actualment, la pols de Crizotinib es pensa que exerceix els seus efectes mitjançant la modulació del creixement, la migració i la invasió de cèl·lules malignes. Altres estudis suggereixen que la pols de Crizotinib també podria actuar per inhibició de l'angiogènesi en tumors malignes.

Per obtenir el derivat 1-feniletanol quiral, Liang i els seus companys de treball han utilitzat diversos microorganismes per a una reducció eficient de la cetona cap a l'intermediari. Altres grups van intentar augmentar l'eficiència i la selectivitat cap a l'intermediari quiral utilitzant enfocaments similars. Una ruta de propòsit publicada per Koning i companys de treball de Pfizer revela l'estratègia per produir l'alcohol racèmic per la reducció tradicional de NaBH4, seguida d'acetilació, resolució mediada per la inversió de PLE i Mitsunobu cap a l'enantiòmer requerit.

Les lipases són sempre la primera opció a l'hora d'obtenir alcohols quirals purs enantioméricos mitjançant resolucions cinètiques o mètodes de resolució cinètica dinàmica (DKR). A més, les lipases es poden combinar amb catalitzadors de racemització, concretament complexos de pal·li, complexos de iridi, vanadi o ruteni. Desafortunadament, segons el nostre coneixement, no es van trobar informes de lipases utilitzades en el kinetic o DKR de 1- (2,6-dichloro-3-fluorophenyl) ethanol.

En el nostre esforç continu cap al desenvolupament de protocols biocatàl·lics per a la síntesi d'intermedis per a la síntesi de l'API, aquí presentem els nostres estudis sobre la cinètica i el DKR de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol, un intermediari important en pols de Crizotinib síntesi


3.Materials en pols de Crizotinib I mètodesaasraw

Nom: Pols de Crizotinib
CAS: 877399-52-5
Fórmula molecular: C21H22Cl2FN5O
Pes molecular: 450.343
Punt de fusió: 197-203 ° C
Temps d'emmagatzematge: RT
Color: pols blanc a pols pàl·lid

1- (2,6-Dichloro-3-fluoro-fenil) -etanol i acetat d'isopropenílic comprats de Sigma-Aldrich. Candida antarctica lipasa B (CAL B) comprada a Novozymes. Tots els altres materials van ser almenys de qualitat reactiva.

  • Reaccions de resolució cinètica

La mescla de la reacció estava composta per una solució 3 mL de 0.048 mmol 1- (2,6-dichloro-3-fluoro-phenyl) -etanol, 0.096 mmol acil donant i 60 mg d'enzim (20% w / v) en dissolvent. Les reaccions de detecció es van realitzar en plaques de carbur de silici a temperatures de 60-80 ° C, amb agitació magnètica per obtenir 1- (2,6-dicloro-3-fluorophenyl) ethyl acetate (1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7.26 (dd, J = 8.3, 5.6 Hz, 5H), 7.03 (t, J = 8.5 Hz, 3H), 6.39 (q, J = 7.1 Hz, 3H), 2.09 (s, 3H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H). Per avaluar la influència dels diferents components del medi de reacció, es van avaluar els enzims, el solvent, el donador de acil i la temperatura. Una partícula 20 μL va ser transferida a un nou vial i 980 μL d'acetat d'etil es va afegir i analitzant en el GC -FID.

  • Reaccions de resolució cinètica dinàmica (DKR) en flux continu

Es van realitzar experiments de flux continu utilitzant un sistema Asia Flow (Syrris) que incloïa una bomba de xeringues, un escalfador i una columna de vidre. La columna de vidre va ser empaquetada amb CAL B i VOSO4.XH2O immobilitzats alternativament. Es va obtenir un reactor de llit 10 mL-packed amb capes d'enzim 4 (cada capa que conté 500 mg del catalitzador) i capes 3 de VOSO4.XH2O (cada capa que conté 500 mg del catalitzador) separades per capes de cotó primes. El reactor ple de llit es va escalfar a 80 ° C i es perfundió amb isooctà a un cabal de 1.0 mL.min? 1. Les reaccions de flux continu es van realitzar mitjançant el bombeig d'una solució d'isooctà (15 mL) de 1- (2,6-dicloro-3-fluoro-fenil) -etanol (0.1 M) i acetat de vinil com a donador d'acil (0.1 M) a través del llit reactor a velocitats de flux de 0.1, 0.5 i 1.0 mL.min? 1, que corresponen als temps de residència de 100, 50 i 10 min, respectivament. A causa del llarg temps de reacció en lot, la solució es recicla en el flux continu per optimitzar els resultats de la conversió. Es van obtenir alicates de 20 μL a partir de la sortida del reactor després de bombar la solució reactiva per dues vegades el temps de residència i després de 21 h. Després, les alíquotes es van diluir amb acetat d'etil a la solució 1.0 mL i es van analitzar mitjançant GC-FID.

  • Anàlisi de cromatografia

Resolució cinètica i resolució dinàmica cinètica
1- (2,6-Dichloro-3-fluorophenyl) -etanol GC-FID: (Shimadzu CG2010 - columna capil·lar quiral Gamadex - 225) Les mostres 8 μL van ser injectades a 117 ° C. El forn es va escalfar a 2 ° C / min fins a 150 ° C i després es va mantenir durant 5 min i 30 ° C / min a 200 ° C i després es va mantenir per a 1 min, amb un flux de 3.0 mL / min i un mode d'injecció Split (Ratio: 20: 1).

  • Resultats i discussions

Sobre la base de la nostra experiència prèvia sobre resolucions cinètiques de derivats de sec-feniletanol, hem après al llarg d'aquests anys que els alcohols aril orto-substituïts són menys reactius per a la resolució cinètica. Atès que 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol (2) conté substituents en ambdues posicions orto, esperàvem llargs temps de reacció per a aquesta transformació. Hem començat examinant la influència del donant acilo en el resultat de la reacció quan s'utilitza CAL B (N435) immobilitzat comercial a 60 ° C i el ciclohexano com a dissolvent durant 10 dies (Taula 1).

Avaluació del donant de acil per a la resolució cinètica de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol (2) mediada per CAL-B immobilitzat.

Entrada Acyl Donor (1 eq) Conv. (%) eeprod (%) E

  • 1 acetat d'isopropenil 44 99> 200
  • 2 Acetat d'etil 32 99> 200
  • 3 acetat de vinil 26 95 54

Condicions de reacció: 1- (2,6-dichloro-3-fluorophenyl) -etanol (2) (0.048 mmol, 10mg), acetato de isopropenil o acetat de vinil o acetat d'etil (1eqv) com a donador d'acil i 60mg (20% w / v) de CAL B Novozym 435 (N435) en ciclohexano (3 mL) durant 10 dies a 60 ° C, mesurat pel mètode GC-FID i es va mesurar l'enantioselectivitat basada en (S) -1- (2,6-dicloro-3-fluorophenyl) ethanol i els corresponents temps de retenció de l'éster.



4.Approvals i indicacions per a la pols de Crizotinibaasraw

El August 26, 2011, l'Administració d'Aliments i Medicaments dels Estats Units va aprovar Crizotinib pols (Xalkori) per tractar certes etapa tardana (avançat o metastàtic localment) càncers no microcític de pulmó de cèl·lules que expressen el gen anormal cinasa del limfoma anaplàsic (ALK). L'aprovació requeria una prova molecular complementària per a la fusió EML4-ALK. Al març, 2016, l'Administració d'Aliments i Drogues dels EUA va aprovar la pols de Crizotinib en el càncer de pulmó cel·lular no petit de ROS1.

Com era d'esperar, l'acetato de isopropenílic va donar els millors resultats a la resolució cinètica de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol (2), arribant a l'enantiòmer R acetilat desitjat en bones conversions i alta selectivitat (Taula 1, entrada 1). L'acetat de vinil era probablement massa reactiu sota les condicions de reacció dissenyades, donant lloc a una disminució de la relació enantiomèrica. Es va realitzar un experiment en blanc per avaluar la reacció no catalizada i es podien obtenir petites quantitats d'alcohol acetilat (<10%). Pel que fa a l'acetat d'etil, sorprenentment, es va presentar una selectivitat interessant amb conversió moderada (Taula 1, entrades 3 i 2 respectivament). Tot i que la taula 1 presenta els resultats de la resolució cinètica després de 10 dies, les reaccions es van controlar durant els primers dies 3 cada 12 h i després del dia 3rd, cada 24 h. El que es podria veure és la millora de la conversió al llarg dels dies fins a 10 dies de reacció. També s'ha avaluat el temps de reacció (12 dies), però no s'ha observat cap millora en la conversió.

Per intentar reduir el temps de reacció, una de les estratègies va ser avaluar l'efecte de majors proporcions de donant d'acil però, malauradament, amb valors més alts que dos equivalents, la proporció enantiomèrica va caure de> 200 a 31, mostrant que l'esterificació química està prenent lloc Un altre intent va ser la detecció d'altres lipases, però no es van trobar millors resultats en comparació amb la comercial CAL B immobilitzada (N435) (Taula S1 - Informació d'assistència).

Per intentar reduir el llarg temps de reacció obtingut per aquest substrat específic, es van avaluar diferents temperatures i dissolvents.

Cribratge de dissolvents per a la resolució cinètica de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol, usant acetato de isopropenil mediada per la CAL B. immobilitzada.

Entrada T (° C) Temps de solvent (dies) Conv. (%) eeprod (%) E

  • 1 60 ACN 5 2 99> 200
  • 2 60 Acetona 5 ndndnd
  • 3 60 MTBE 5 ndndnd
  • 4 60 Toluè 5 11 99> 200
  • 5 60 Hexane 6 ndndnd
  • 6 60 Heptane 6 39 99> 200
  • XSOX 8 Isooctà 70 5 45> 99
  • XSOX 9 Isooctà 75 5 40> 99
  • XSOX 10 Isooctà 80 5 44> 99

Condicions de reacció: 1- (2,6-dichloro-3-fluorophenyl) ethanol (2) (0.048 mmol, 10mg), acetato de isopropenil (2eqv) com a donador d'acil, i 60mg (20% w / w) Novozym 435 en diferents dissolvents (3 mL, ACN - acetonitril, MTBE - metil ter-butil éter), mesurat pel mètode GC-FID i l'enantioselectivitat es va mesurar a partir de (S) -1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol i els corresponents temps de retenció d'éster.

Com es va observar a la Taula 2, entre tots els dissolvents avaluats per a la resolució desitjada, l'isooctà presentava els millors resultats en termes de temps de reacció. Sota les condicions estudiades, a 70 ° C, l'isooctane podria portar a 45% de conversió (42% rendiment) després de 5 dies, una reducció de 50% en temps de reacció (Taula 2, entrada 7). Altres dissolvents com acetona, MTBE, acetonitril (ACN), toluè i hexà, han fracassat o condueixen a conversions molt pobres. A temperatures més altes, no s'ha pogut observar cap millora en la conversió de la reacció. Una excepció és l'heptà, que podria generar resultats similars a l'isooctano, però el posterior ens pot portar a una millor estabilitat de l'enzim immobilitzat.

Malgrat els bons resultats obtinguts en condicions de resolució cinètica, 50% del producte és residual o s'ha de recompondre per tornar-lo a utilitzar en una altra campanya.

Basant-nos en els resultats obtinguts per a la resolució cinètica de 1- (2,6-dichloro-3-fluorophenyl) ethanol (2), vam decidir avançar per desenvolupar un mètode per al DKR que proporcionés l'enantiòmer R acetilat desitjat 1- (2,6-dicloro-3-fluorophenyl) ethanol (2) com a producte principal. Aquesta estratègia es basa en el fet que després de DKR, una hidròlisi simple condueix a l'enantiòmer desitjat, que es pot acoblar amb la cadena lateral a través del procediment de substitució aromàtica nucleòfila estàndard. Es van provar dos catalitzadors de racemització diferents per a aquest propòsit, el sulfat de vanadyl 19-25 i el catalitzador de ruteni Shvo. 26-30

Les reaccions es van realitzar a 70 ° C, utilitzant acetato de isopropenilo com a donador de acilo i la conversió analitzada per GC-FID diàriament durant 5 dies. És important tenir en compte que els donants de acil de cadena curta no són la millor opció per a DKR mediats per catalitzadors de vanadi, ja que ja han informat altres grups. 20,22 Malgrat això, hem decidit mantenir l'acetat d'isopropenil ja que ja sabem que la resolució cinètica hauria de ser el pas limitador de velocitat del nostre procés i un donador de acil de cadena llarga, com decanoato de vinil, podria augmentar encara més el temps de reacció.31 Els resultats obtinguts per a la resolució cinètica dinàmica es presenten a la Taula 3.

DKR de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol (2) mediada per CAL-B immobilitzat i diferents catalitzadors de racemització en condicions de lot.

Racemització d'entrada Catalyst Conv. (%) eeprod (%) Selectivitat (%)

  • 1 VOSO4 30 98> 99
  • 2 Shvo 35 92> 99

Condicions de reacció: es van transportar 1- (2,6-dicloro-3-fluoro-fenil) -etanol (0,1 M), acetato isopropenílico (0,1 M) com a donador d'acil, en isooctano (15 mL) barrejant tots els reactius i catalitzadors en un lot reactor Determinat per GC-FID i l'enantioselectivitat es va mesurar a partir de (S) -1- (2,6-dicloro-3-fluorophenyl) etanol i els corresponents temps de retenció de l'éster.


Assaigs 5.Clinicals per pols de Crizotinibaasraw

La pols de Crizotinib va ​​fer que els tumors es retractessin o s'estabilitzessin en 90% dels pacients 82 que portaven el gen de fusió ALK. Els tumors es van reduir almenys 30% en 57% de les persones tractades. La majoria tenia adenocarcinoma, i mai havia fumat o eren fumadors anteriors. Havien estat sotmesos a un tractament amb una mitjana de tres altres fàrmacs abans de rebre pols de Crizotinib, i només es preveia que el 10% responia a la teràpia estàndard. Es van rebre 250 mg de Crizotinib pols dues vegades al dia per una mitjana de sis mesos. Aproximadament el 50% d'aquests pacients va patir almenys un efecte secundari, com ara nàusees, vòmits o diarrea. Algunes respostes a la pols de Crizotinib han durat fins a 15 mesos.

Un assaig de fase 3, PERFIL 1007, compara Crizotinib en pols amb quimioteràpia estàndard de segona línia (pemetrexed o taxotere) en el tractament d'ALS-NSCLC positiu. Addicionalment, un assaig de fase 2, PERFIL 1005, estudia pacients que compleixen criteris similars que han rebut més d'una línia de quimioteràpia prèvia.

La pols de Crizotinib també s'està provant en assaigs clínics de limfoma anaplàstic avançat avançat i de neuroblastoma.

Al febrer, 2016, l'estudi de la fase III de J-ALEX que comparava l'alectinib amb Crosotinib en pols amb ALK-positiva NSCLC metastàsic es va acabar aviat perquè una anàlisi provisional mostrava que la supervivència lliure de progressió era més llarga amb l'alectinib. Aquests resultats es van confirmar en una anàlisi 2017.

Com es pot observar a la Taula 3, el protocol de racemització realitzat amb el catalitzador de sulfat de Shvo o vanadyl, condueix a conversions moderades cap a l'alcohol quiral desitjat. És important tenir en compte que, sota les condicions de reacció estudiades, el catalitzador de Shvo no va funcionar millor que VOSO4, fins i tot presentant una disminució de l'excés enantiomèric del producte, mostrant que VOSO4 podria ser una alternativa interessant i més barata per a millores addicionals. 19-25,32- 34

Seguint els nostres estudis recents sobre l'ús de VOSO4 per a DKR en condicions de fluix continu, 31 hem aplicat les reaccions ja optimitzades per al sec-feniletanol al nostre substrat 1- (2,6-dichloro-3-fluorophenyl) ethanol. D'aquesta manera, la reacció es va realitzar en un sistema de bucle tancat a causa de l'alt temps de reacció necessari per al pas de la resolució cinètica. Encara que no observem cap incompatibilitat entre CAL B i VOSO4,19-25,32-34, tal com es va informar anteriorment per altres autors, es va dissenyar un reactor de llit en forma de flux continu que es va disposar alternativament de quatre capes de l'enzim immobilitzat i tres capes de VOSO4 al llarg d'un columna de vidre i separada físicament per una fina capa de cotó. Els resultats obtinguts en temps i velocitats de reacció diferents es presenten a continuació (Taula 4).

Pols de Crizotinib cruda (877399-52-5) hplc≥98% | Reactors d'AASraw R & D

DKR de flux continu de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol.

Taxa de flux d'entrada (mL.min? 1) Temps de reacció (dies) Conv. (%) eeprod (%)

  • 1 1.0 1 28 98
  • 2 3 38 98
  • 3 5 44 98
  • 4 0.5 1 32 98
  • 5 3 47 96
  • 6 5 57 96
  • 7 0.1 1 33 88
  • 8 3 47 84
  • 9 5 47 82

Condicions de reacció: es va realitzar 1- (2,6-dicloro-3-fluoro-fenil) -etanol (2) (0,1 M), acetato isopropenílico (0,1 M) com a donador de acilo, en isooctano (15 mL) mitjançant el bombeig del llit -reactor empaquetat a diferents cabals. La columna de vidre va ser empaquetada amb N435 immobilitzat i VOSO4.XH2O alternativament de manera que un reactor 10 mL-packed bed amb capes d'enzim 4 (cada capa que conté 500 mg del catalitzador) i capes 3 de VOSO4.XH2O (cada capa que conté 500 mg del catalitzador) separats per fines capes de cotó. El reactor ple de llit es va escalfar a 80 ° C. Determinat per GC-FID i enantioselectivitat mesurats a partir de (S) -1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol i els corresponents temps de retenció de l'éster.

Els resultats presentats a la Taula 4 mostren que, en condicions de flux continu, el DKR mediada per Novozyme 435 i VOSO4 és més eficient en termes de conversió i temps de reacció en comparació amb la configuració per lots, tal com s'observa a l'entrada 6 (Taula 4) . No es pot observar cap millora addicional en la conversió de la reacció augmentant el temps de reacció, que sembla ser una limitació en aquest cas concret. Augmentar el temps de residència mitjançant l'ús de baixos nivells de flux no condueix a una millor conversió i es pot observar un petit descens de l'excés enantiomèric del producte (entrades 7-9, Taula 4). A 0.5 mL.min? 1 es pot obtenir una millora significativa en la conversió de la reacció en comparació amb el procés de procés per lots, és important tenir en compte que tot i que la reacció s'ha realitzat durant 5 dies, el temps real de contacte entre els reactius i els catalitzadors és molt menys ja que funciona en un sistema de circuit tancat. Un altre avantatge de DKR és el fet que el material de partida restant és racèmic capaç de ser reutilitzat en una campanya diferent sense més purificació.


6.La conclusió de la pols de Crizotinibaasraw

En conclusió, hem desenvolupat diferents enfocaments cap a la producció de 1- (2,6-dicloro-3-fluorofenil) etanol (2), un intermediari important per a la síntesi de pols de Crizotinib (1). La resolució cinètica es va aconseguir amb conversions molt bones i amb alta selectivitat, mentre que la resolució cinètica dinàmica, també en condicions de lots, va proporcionar resultats pobres de les conversions amb un bon excedent enenàmic del producte. Es va obtenir una millor millora traduint la resolució cinètica dinàmica a un protocol de flux continu on la conversió es pot millorar amb una bona selectivitat encara.


7. On és Compreu pols de Crizotinib?aasraw

AASraw és un dels recursos legítims per triar, si hi ha més informació. necessito saber, si us plau contacti'ns.


0 gustos
2657 Vistes

també et pot agradar

Els comentaris estan tancats.